TEV Protease (His-tag)是一种在大肠杆菌中重组表达的带 His 标签(6X His tag)的烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus, TEV)的 半胱氨酸蛋白酶，能特异性地识别七肽序列 Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/ Ser，并在 Gln 和 Gly/ Ser 氨基酸残基之间进行酶切，常用于去除融合蛋白的 Glutathione S-transferase (GST)、His 或者其它标签的蛋白酶。 建议把 GST 或 His 等标签设计在融合蛋白的 N 端，并在 GST 或 His 等标签与目的蛋白之间设计加入 TEV Protease 专一 性识别与酶切的上述七肽序列。这样在 GST 或 His 标签被酶切后，在目的蛋白的 N 端仅有一个额外的 Gly/ Ser 氨基酸残基， 从而最大限度地减少了对目的蛋白结构和功能的影响。

TEV Protease 的最佳酶切温度是 30ºC，在 29 - 34ºC 范围内均具有较高的酶活性，但当温度达到或高于高 37ºC 时，其酶 活性会急剧下降。在实际操作过程中，为尽量保留目的蛋白的结构和生物活性，建议 4ºC 用 TEV Protease 酶切过夜。TEV Protease 在 pH6.0 - 9.0 范围内具有活性，而当 pH 小于或等于 5 时，会失去酶活性。 TEV Protease 还有一个突出的优点是在 400 mM 咪唑中仍有较高活力，因此对于很多用镍柱纯化的 His 标签目的蛋白， 可直接将 TEV Protease 加入含高浓度咪唑的刚刚纯化的目的蛋白溶液中，在 4ºC 边透析去除咪唑边进行酶切。当然也可以在透析后再用 TEV Protease 进行酶切以去除 His 标签。经过酶切的目的蛋白，溶液中带有 His 标签的本 TEV Protease 以及切除 下来的 His 标签，都可以通过与镍柱结合而去除。 TEV Protease 的酶活性不会被常见的丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibtor)如 PMSF、AEBSF、bestatin、pepstatin、 E-64、TLCK和EDTA所抑制。但靶向半胱氨酸(Cysteine)残基的蛋白酶抑制剂如NEM或IAA等，可以显著抑制TEV Protease 的酶活力，因为天然的 TEV Protease 含有其维持酶活力所必需的 Cys151。

纯度：>SDS-PAGE测定为95%。

生物活性：

产品说明：

货号：Abt-P-5026

剂型：无色澄清液体或冻干粉

基本信息：

来源：微生物重组蛋白

分子量： 20.8 KDa（SDS-PAGE检测）

活性单位： 约 10 0000 U/ mg ,  单位定义：在30度下、1小时内，切割2ug的融合蛋白，超过90%被切开所需要的酶量定义为一个单位（U）。

纯度：≥95 %（SDS-PAGE检测）

缓冲液：1×PBS (pH7.4)

使用说明：特异性地识别七肽序列 Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/ Ser，并在 Gln 和 Gly/ Ser 氨基酸残基之间进行酶切

保存条件：4℃短期保存（根据用量分装后置于-20℃或-80℃，可保存更长时间，但避免反复冻融）。

运输条件： 低温冰袋保存运输

安全提示：本试剂仅用于研发或生产，严禁用于人体实验。